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如何选择合适的HA标签抗体?
点击次数:46 发布时间:2019-03-28

       HA标签系统利用一个HA (流感病毒血凝素,influenza hemagglutinin epitope: YPYDVPDYA)短肽肽融合到目标蛋白。HA标签可位于蛋白质的C端或N端,该系统已广泛应用于多种细胞类型,相应的HA标签抗体也被广泛应用。HA 标签抗体能特异识别C末端或N末端带有HA标签(HA-tagged)的融合蛋白,也可以用于检测和HA tag融合表达蛋白的表达•●、细胞内ding位,以及纯化•●、定性或定量检测HA tag融合表达蛋白等。

选择合适HA标签抗体需要考虑的因素

       我们在选择一个标签抗体时,主要根据自己实验应用上的需要。这里需要考虑的因素包括,HA抗体的应用检测类型•●、HA抗体的克隆性及制备来源等。比如该HA抗体是否能用于免疫荧光IF的检测?是否可以用于Western Bloting和免疫沉淀IP实验?是否需要HRP偶联的单克隆HA标签抗体?还是一个兔来源的HA多抗更合适?

      一般来说,应用类型越多,在使用过程中的选择余地就越大,而小鼠源的单克隆抗体一般在特异性•●、稳定性都要优于多克隆抗体,而多克隆。另外,抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面,也即相当于实际应用时的稀释比率。一个效价高的100μl HA抗体(假如其WB检测的稀释比率是1:5000,最终使用液相当于500ml),要比效价低的1ml的HA抗体(假如WB检测的稀释比率是 1:200,最终使用液相当于200ml)性价比更高。因此在选择抗体的时候,不但需要考虑抗体的量,还需要考虑抗体的效价,即不同应用的建议稀释比率。

 

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