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做实验 | 这个Masson 染色技巧,相当了得 skr~
点击次数:59 发布时间:2018-10-11

      Masson三色染色是结缔组织染色中最经典的一种方法,又称马松染色,是显示组织中纤维的主要方法之一,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。

  Masson染色

该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关,分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密•●、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的•●、渗透性高的组织。然而,淡绿或苯胺蓝的分子量都很大,因此Masson染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈绿色或蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。

 病理诊断意义

(1)器官硬化性疾病的观察:如肝硬变•●、心肌瘢痕的观察,胶原染色更易于观察诊断。

(2)瘢痕与淀粉样物质鉴别:前者胶原纤维染色为阳性,后者为阴性。

(3)骨纤维异常增殖病与骨纤维化的鉴别:利用胶原纤维染色可较易观察前者胶原纤维紊乱,纵横交错,后者较规则。

样本要求:组织片充分固定和脱蜡。

 实验步骤

1.石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ10min-无水乙醇Ⅱ10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸馏水洗。

2.苏木素染细胞核:masson染色试剂盒内Weigert氏铁苏木素染5min,自来水洗,1%的盐酸酒精分化数秒,自来水冲洗,流水冲洗数分钟返蓝。

3.丽春红染色:masson染色试剂盒内丽春红酸性品红液染5-10 min,蒸馏水快速漂洗。

4.磷钼酸处理:masson染色试剂盒内磷钼酸水溶液处理约3-5 min。

5.苯胺蓝染色:不用水洗,直接用masson染色试剂盒内苯胺蓝液复染5min。

6.分化:1%冰醋酸处理1min。

7.脱水封片:将切片依次放入95%酒精I 5min -95%酒精II 5min-无水乙醇Ⅰ5min -无水乙醇Ⅱ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min中脱水透明,将切片从二甲苯拿出来稍晾干,中性树胶封片。

8.显微镜镜检,图像采集分析。

 

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